Proteini u urinu: metode određivanja. Laboratorijske metode istraživanja

Sastav radnog mjesta za određivanje proteina u urinu uključuje sljedeće elemente:

  1. Hemijske epruvete, epruvete za aglutinaciju.
  2. Set gradiranih pipeta.
  3. Pipete sa uskim izvučenim krajem.
  4. Alkoholne lampe ili plinski gorionik.
  5. Crni papir.
  6. Glacijalna sirćetna kiselina.
  7. Sulfosalicilna kiselina.
  8. Koncentrovana azotna kiselina.
  9. Destilirana voda.

Metode za određivanje proteina u urinu

Sve metode koje se koriste za kvalitativno određivanje proteina u urinu zasnivaju se na koagulaciji proteina. Savijanje proteina je izraženo u različitim stepenima zamućenost (od opalescencije do velike zamućenosti) ili gubitak ljuskica.

Kvalitativno određivanje proteina u urinu može se provesti na jedan od sljedećih načina:

  1. ključanje sa 10% rastvorom sirćetne kiseline;
  2. reakcija s 20% otopinom sulfosalicilne kiseline;
  3. reakcija sa 50% rastvorom azotne kiseline (Gellerov test);
  4. reakcija sa 1% rastvorom azotne kiseline u zasićenom rastvoru kuhinjska sol(modifikovani Hellerov test prema Larionovoj).

Prije kvalitativnog određivanja proteina u urinu, provode se sljedeći pripremni radovi:
1. Zamućen urin filtrira kroz papirni filter. Ako nije moguće dobiti bistar filtrat, ponovite filtraciju kroz isti filter ili pomiješajte urin s netransparentnim filtratom. veliki broj infuzorijalno tlo ili talk, nakon čega se filtrira.
2. Ako je urin alkalan, zakiseli se sa 10% rastvorom sirćetne kiseline do blago kisele reakcije pod kontrolom lakmusa ili univerzalnog indikatorskog papira.
3. Sa niskim sadržajem soli (svijetložuti ili blijedožuti urin sa niskom specifičnom težinom) svakom
U uzorak dodajte nekoliko kapi zasićene otopine kuhinjske soli, jer nedostatak soli uzrokuje koagulaciju proteina.
4. Stepen zamućenosti se posmatra korišćenjem crne pozadine. Kao pozadina se koristi crni karton ili crni papir koji se koristi u fotografiji. Uzimajući u obzir reakciju na crnoj pozadini, možete identificirati najmanji stupanj zamućenosti.

Numerisane epruvete se stavljaju u poseban stalak. Oni izvode jednu od dolje opisanih reakcija.

1. Testirajte prokuhavanje sa 10% rastvorom sirćetne kiseline. Za izvođenje ovog testa potrebna vam je 10% otopina octene kiseline, koja se priprema na sljedeći način: 10 ml glacijalne octene kiseline se stavi u cilindar i dopuni destiliranom vodom do oznake od 100 ml.

Tehnika određivanja proteina. U hemijsku epruvetu stavlja se 10-12 ml filtriranog urina slabo kisele reakcije. Onda gornji dio epruvete s urinom pažljivo se zagriju do ključanja i u njih se doda 8-10 kapi 10% otopine octene kiseline. Epruveta s urinom gleda se na crnoj pozadini u propuštenom svjetlu. U prisustvu proteina u urinu pojavljuje se zamućenost različitog stepena (od opalescencije do jakog zamućenja) ili se pojavljuju ljuspice. Donji dio epruvete, koji nije grijan, služi kao kontrola. Ovaj test detektuje količinu proteina počevši od 0,015%o (%o - promille).

2. Reakcija sa 20% rastvorom sulfosalicilne kiseline. 20% rastvor sulfosalicilne kiseline priprema se na sledeći način: 20 g sulfosalicilne kiseline se rastvori u 70-80 ml destilovane vode, prebaci u cilindar od 100 ml i dopuni destilovanom vodom do oznake. Pripremljeni reagens se čuva u posudi od tamnog stakla.

Tehnika određivanja proteina. U dvije epruvete istog prečnika stavi se 2-3 ml filtrirane mokraće slabo kisele reakcije, u jednu epruvetu se doda 3-4 kapi 20% rastvora sulfosalicilne kiseline, druga epruveta služi kao kontrolu. Ako u epruveti sa reagensom ima proteina, pojavljuje se zamućenost ili ispadaju ljuspice koaguliranog proteina. U kontrolnoj cijevi tečnost ostaje bistra. Sulfosalicilna kiselina, zajedno sa serumskim proteinima, taloži albumoze (peptide), koje su produkt razgradnje proteina. Da bi se razjasnio uzrok mutnog urina, epruveta sa urinom se zagreva. Povećava se zamućenost uzrokovana stvaranjem proteina sirutke, dok zamućenost uzrokovana prisustvom albumoze nestaje. Ovaj test ima istu osjetljivost kao i prethodni.

3. Reakcija sa 50% rastvorom azotne kiseline (Gellerov test). 50% rastvor azotne kiseline priprema se na sledeći način: dodati 50 ml destilovane vode (razblaženje 1:1) u 50 ml azotne kiseline specifične težine 1,2-1,4.

Tehnika određivanja proteina. U usku malu epruvetu (aglutinacijsko blato) sipa se 1 ml 50% dušične kiseline. 1 ml filtriranog test mokraće uzima se u pipetu sa uskim proširenim krajem, nanese na reagens i epruvetu se prenosi u vertikalni položaj. Kada je protein prisutan, bijeli prsten se pojavljuje na sučelju tekućine. Vrijeme pojavljivanja prstena i njegova svojstva zavise od količine proteina: ako ima malo proteina, prsten se ne pojavljuje odmah, pa se njegov izgled prati 2,5-3 minute. Minimalna količina proteina određena ovom metodom je 0,033°/oo. Sa nižim sadržajem proteina u urinu, prsten se ne formira. Rezultati reakcije se snimaju na crnoj pozadini u propuštenoj svjetlosti.

4. Reakcija sa 1% rastvorom azotne kiseline u zasićenom rastvoru kuhinjske soli - modifikovani Hellerov test (prema Larionovoj). Za izvođenje testa upotrijebite 1% otopinu dušične kiseline pripremljenu u zasićenom rastvoru kuhinjske soli (Larionova reagens). 35 g kuhinjske soli rastvori se u 100 ml destilovane vode, rastvor se filtrira, 99 ml pripremljenog zasićenog rastvora kuhinjske soli doda se u 1 ml koncentrovane azotne kiseline specifične težine 1,2-1,4.

Tehnika određivanja proteina isto kao u reakciji sa 50% rastvorom azotne kiseline (Gellerov test), ali se umesto 1 ml 50% rastvora azotne kiseline u epruvetu sipa 1 ml Larionove reagensa i nanese 1 ml urina. to. Pojava bijelog prstena na međuprostoru tekućina ukazuje na prisustvo proteina u urinu koji se testira. Larionova test je osjetljiv kao i Hellerov test.

5. Kolorimetrijski (suhi) test za kvalitativno određivanje proteina. Kolorimetrijski (suvi) test za kvalitativno određivanje proteina u urinu zasniva se na učinku koji protein ima na boju indikatora u puferskom rastvoru.

Tehnika određivanja proteina. Komad indikatorskog papira namijenjenog za određivanje proteina uroni se u urin za kratko vrijeme. Test se smatra pozitivnim ako komad papira postane plavo-zelen.

Kvantitativno određivanje proteina u urinu

Kvantitativno određivanje proteina u urinu zasniva se na činjenici da kada se urin koji sadrži protein nanese slojem 50% rastvora azotne kiseline ili Larionove reagensa, na granici dve tečnosti nastaje beli prsten, a ako se pojavi bistar beli prsten za 3 minuta, tada je sadržaj proteina 0,033% o ili 33 mg u 1000 ml mokraće. Pojava prstena prije 3 minute ukazuje na veći sadržaj proteina u urinu.
Prilikom kvantifikacije proteina u urinu, poštuju se sljedeća pravila:

  1. Kvantitativno određivanje proteina provodi se samo u onim dijelovima urina gdje je kvalitativno otkriven.
  2. Određivanje se vrši pažljivo filtriranim urinom.
  3. Striktno se poštuje tehnika nanošenja slojeva test urina sa 50% rastvorom azotne kiseline ili Larionova reagensa u odnosu reagens prema urinu (1:1).
  4. Vrijeme pojave prstena određuje se pomoću štoperice: u konačnom proračunu količine proteina uzima se u obzir vrijeme nanošenja slojeva urina na dušičnu kiselinu, što je 15 sekundi.
  5. Razrjeđivanje urina vrši se na osnovu svojstava prstena. U ovom slučaju, svako sljedeće razrjeđivanje urina priprema se iz prethodnog.
  6. Prstenovi su identificirani na crnoj pozadini.

Najčešće su dvije metode za kvantitativno određivanje proteina u urinu: metoda Roberts-Stolnikov-Brandberg i metoda S. L. Ehrlicha i A. Ya.

  1. Roberts-Stolnikov-Brandbergova metoda. Prema ovoj metodi, količina proteina u urinu se određuje razrjeđivanjem dok se, kada se urin sljedeći sloj nanese 50% otopinom dušične kiseline ili Larionovog reagensa, prsten ne pojavi tačno za 3 minute. Količina proteina se izračunava množenjem 0,033% sa stepenom razblaženja urina. Dobijeni rezultat izražava količinu proteina u miligramima na 1000 ml urina, odnosno u promilima (%o).
  2. Metoda S. L. Ehrlicha i A. Ya. Niz aglutinacionih epruveta se postavlja u stalak u koji se prvo sipa 1 ml 50% rastvora azotne kiseline ili Larionova reagensa. Ispitni urin se uzima posebnom, čistom, suvom pipetom sa uskim, izvučenim krajem i nanosi na reagens, nakon čega se uključuje štoperica. Vrijeme pojavljivanja prstena prati se postavljanjem epruvete na crnu podlogu. Kada se pojavi zvono, štoperica se isključuje.

Prilikom nanošenja slojeva urina, ovisno o količini proteina, može se pojaviti kompaktan, širok ili navojni prsten. Kompaktan, širok prsten pojavljuje se odmah nakon nanošenja slojeva urina na reagens. Prsten nalik na niti može se pojaviti odmah, prije isteka jedne minute ili u roku od jedne do četiri minute.

Ako se prsten nalik na niti pojavi u roku od jedne do 4 minute, nema potrebe za razrjeđivanjem urina!
Za izračunavanje količine proteina u ovom slučaju dovoljno je koristiti tabelarni plan koji su predložili autori (Tablica 1).

Primjer 1. Kada je urin nanesen na reagens, formirao se prsten nalik na niti u roku od 2 minute. Da je prsten formiran za 3 minute, količina proteina bi bila 0,033%.

U ovom slučaju, prsten je formiran ranije. Odgovarajuća korekcija, prema tabeli planova, za vrijeme od 2 minute je jednaka 1+1/8. To znači da će protein u datoj porciji urina biti 1+1/8 puta veći od 0,033°/oo, odnosno 0,033%o X(1+1/8) = 0,037°/oo.

Kada se u roku od 1 minute, tj. nakon 40-60 sekundi pojavi prsten nalik na niti, napravite jedno 1,5-struko razrjeđivanje urina (2 dijela urina + 1 dio vode), a zatim ponovo nanesite razrijeđeni urin na reagens i zabilježite izgled prstena. Prilikom izračunavanja rezultata uzima se u obzir da je urin razrijeđen 1,5 puta.

Primjer 2. Nakon nanošenja slojeva urina razrijeđenog 1,5 puta, u roku od 2 minute pojavio se prsten nalik na niti. Da se prsten pojavio nakon 3 minute, protein bi bio 0,033%. Odgovarajuća izmjena prema tabeli plana za vrijeme od 2 minute je 1+1/8. Proteina u urinu sadrži 0,033%oX1,5X(1+1/8) = 0,056%o.

Ako se odmah pojavi prsten u obliku niti, urin se razrijedi 2 puta (1 dio urina + 1 dio vode). Razrijeđeni urin se ponovo nanosi na reagens i nakon 1 minute primjećuje se pojava prstena.

Primjer 3. Prilikom nanošenja 2 puta razrijeđenog urina na reagens, nakon 1 minute i 15 sekundi pojavio se prsten nalik na niti. Tada će količina proteina u testiranom urinu, po analogiji sa prethodnim proračunima, biti jednaka
0,033%oH2H(1+3/8) = 0,091%.
Ako se pojavi širok prsten, urin se razrijedi 4 puta (1 dio urina + 3 dijela vode).
Uz naknadno nanošenje slojeva razrijeđenog urina, prsten nalik na niti može se formirati prije ili nakon jedne minute. U takvim slučajevima količina proteina se izračunava po analogiji sa prethodnim primjerima, tj. 0,033% o se pomnoži sa stepenom razblaženja i odgovarajućom korekcijom.

Primjer 1. Nakon razrjeđivanja urina 4 puta, odmah se pojavio prsten. Urin se razblaži 2 puta. Nakon nanošenja slojeva urina razrijeđenog 8 puta (4X2), formirao se prsten nalik na niti u roku od 1,5 minuta. U ovom slučaju, količina proteina je 0,033%oX8X1,25 = 0,33%o, itd.
Kada se pojavi kompaktni prsten, urin se razrijedi 8 puta (1 dio urina + 7 dijelova vode). Kada se razrijeđeni urin naknadno nanese na reagens, može se formirati ili kompaktan, širok ili navojni prsten.

Primjer 2. Kada se urin nanese na azotnu kiselinu, odmah se formira kompaktni prsten. Urin se razrijedi 8 puta (1 dio urina + 7 dijelova vode) i ponovo slojevito. Ovo je opet proizvelo kompaktan prsten. Zatim se urin razrijedi još 8 puta (da biste to učinili, 1 dio razrijeđenog urina uzmite u cilindar ili epruvetu i dodajte 7 dijelova vode). Nakon još jednog sloja razrijeđenog urina, odmah se formirao prsten nalik na niti. Urin se razrijedi 2 puta (1 dio urina + 1 dio vode). Nakon još jednog sloja razrijeđenog urina, u roku od 2 minute formirao se prsten nalik na niti. Količina proteina u datoj porciji urina izračunava se na sljedeći način: 0,033.%oX8X8X2X(1+1/8) = 4,8%o.

Pored tabele plana, postoji i tabela sa izračunatim ciframa proteina (tabela 2). Ako urin nije razrijeđen, tada se količina proteina nalazi u koloni “Cijeli, nerazrijeđeni urin”. Kada razrjeđujete urin cijeli broj puta (8,4,2), koristite tabelu. 1. Prilikom razrjeđivanja urina 1,5 puta koristite tabelu. 2.

Tehnika korištenja tablice za određivanje sadržaja proteina u urinu

U odgovarajućim kolonama tabele navesti vreme pojavljivanja prstena i stepen razblaženja urina.
Broj koji se nalazi na presjeku horizontalnog i vertikalne linije, izveden iz ova dva indikatora, pokazuje količinu proteina u testiranom urinu (%o).

Moguće je da s pozitivnim kvalitativnim testom na proteine, prsten se ne formira kada se slojevi s 50% otopinom dušične kiseline. To znači da u urinu ima manje od 0,033% proteina. U takvim slučajevima, količina proteina u formi za analizu označava se terminom „tragovi“.

Ako je protein kvantificiran, sadržaj proteina u promilu je zabilježen na obrascu za analizu urina, na primjer, "protein - 0,66%o."

Osim toga kvantifikacija proteina u posebnom dijelu urina, izračunajte njegovu dnevnu količinu u gramima. U tu svrhu prikuplja se dnevni urin, mjeri se njegova količina i utvrđuje sadržaj proteina u promilu. Zatim se vrši proračun. Na primjer, dnevna količina urina je 1800 ml, proteina je 7°/oo. To znači da dnevna količina urina sadrži proteine: 1,8X7 = 12,6 g.

26.02.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

Normalno, protein se izlučuje urinom u relativno malim količinama, obično ne više od 100-150 mg/dan.

Dnevna diureza u zdrava osoba iznosi 1000-1500 ml/dan; tako, koncentracija proteina u fiziološkim uslovima iznosi 8-10 mg/dL (0,08-0,1 g/L).

Ukupni protein u urinu predstavljen je sa tri glavne frakcije - albuminom, mukoproteinima i globulinima.

Albumin u urinu je onaj dio serumskog albumina koji je filtriran u glomerulima i nije ponovo apsorbiran u glomerule. bubrežnih tubula; Normalno izlučivanje albumina u urinu je manje od 30 mg/dan. Drugi glavni izvor proteina u urinu su bubrežni tubuli, posebno distalni dio tubula. Ovi tubuli luče dvije trećine ukupne količine proteina u urinu; od ove količine, približno 50% predstavlja Tamm-Horsfall glikoprotein, koji se luči epitelom distalnih tubula i igra važnu ulogu u formiranju urinarnog kamenca. Ostali proteini su prisutni u urinu u malim količinama i potiču iz proteina plazme niske molekularne težine filtriranih kroz bubrežni filter koji se ne reapsorbuju u bubrežnim tubulima, mikroglobulina iz bubrežnog tubularnog epitela (RTE), kao i iz prostate i vaginalnog iscjetka.

Proteinurija, odnosno povećanje proteina u mokraći, jedan je od najznačajnijih simptoma koji odražava oštećenje bubrega. Međutim, brojna druga stanja takođe mogu biti praćena proteinurijom. Dakle, postoje dvije glavne grupe proteinurije: bubrežna (prava) i ekstrarenalna (lažna) proteinurija.

Kod bubrežne proteinurije, protein ulazi u urin direktno iz krvi zbog povećane permeabilnosti glomerularnog filtera. Bubrežna proteinurija se često javlja kod glomerulonefritisa, nefroze, pijelonefritisa, nefroskleroze, amiloidoze bubrega, razne forme nefropatije, na primjer nefropatija trudnoće, groznica, hipertenzija, itd. Proteinurija se može otkriti i kod zdravih ljudi nakon teškog fizičkog napora, hipotermije i psihičkog stresa. Kod novorođenčadi u prvim nedeljama života primećuje se fiziološka proteinurija, a sa astenijom kod dece i adolescenata u kombinaciji sa brz rast u dobi od 7-18 godina moguća je ortostatska proteinurija (u uspravnom položaju tijela).

Kod lažne (ekstrarenalne) proteinurije, izvor proteina u urinu je mješavina leukocita, eritrocita i epitelnih urotelnih stanica urinarnog trakta. Propadanje ovih elemenata, posebno je izraženo kada alkalna reakcija urina, dovodi do oslobađanja proteina u urin koji je već prošao bubrežni filter. Posebno visok stepen lažne proteinurije izaziva krv u mokraći kod obilne hematurije može dostići 30 g/l ili više. Bolesti koje mogu biti praćene ekstrarenalnom proteinurijom - urolitijaza, tuberkuloza bubrega, tumori bubrega ili urinarnog trakta, cistitis, pijelitis, prostatitis, uretritis, vulvovaginitis.

Klinička klasifikacija uključuje blagu proteinuriju (manje od 0,5 g/dan), umjerenu (0,5 do 4 g/dan) ili tešku (više od 4 g/dan).

Većina pacijenata s bubrežnom bolešću, kao što je akutni glomerulonefritis ili pijelonefritis, ima umjerenu proteinuriju, ali pacijenti s nefrotskim sindromom obično izlučuju više od 4 g proteina u urinu dnevno.

Za kvantitativno određivanje proteina koristi se širok raspon metode, posebno objedinjenu metodu Brandberg-Roberts-Stolnikov, biuretsku metodu, metodu sa sulfosalicilnom kiselinom, metode koristeći Coomassie plavu boju, pirogalol crvenu boju, itd.

Upotreba različitih metoda za određivanje proteina u urinu dovela je do ozbiljne zabune u tumačenju normalnih granica sadržaja proteina u urinu. Budući da se u laboratorijima najčešće koriste dvije metode - sa sulfosalicilnom kiselinom i pirogalol crvenom bojom, razmotrit ćemo problem ispravnosti granica normi posebno za njih. Sa stanovišta sulfosalicilne metode, u normalnom urinu sadržaj proteina ne bi trebao biti veći od 0,03 g/l, sa stanovišta pirogalol metode - 0,1 g/l! Razlike su trostruke!!!

Niske vrijednosti normalne koncentracije proteina u urinu pri korištenju sulfosalicilne kiseline su posljedica sljedećih točaka:

  • Kalibraciona kriva je konstruisana korišćenjem vodenog rastvora albumina. Sastav urina se veoma razlikuje od vode: pH, soli, jedinjenja male molekulske težine (kreatinin, urea, itd.). Kao rezultat toga, prema Altshuleru, Rakovu i Tkachevu, greška u određivanju proteina u urinu može biti 3 puta ili više! One. tačni rezultati određivanja mogu se dobiti samo u slučajevima kada je urina vrlo malo specifična težina a po sastavu i pH je blizak vodi;
  • veća osjetljivost sulfosalicilne metode na albumin u odnosu na druge proteine ​​(dok, kao što je gore navedeno, albumin u normalnim uzorcima urina ne čini više od 30% ukupnog proteina u urinu);
  • ako se pH urina pomakne na alkalnu stranu, dolazi do neutralizacije sulfosalicilne kiseline, što također uzrokuje potcjenjivanje rezultata određivanja proteina;
  • brzina taloženja precipitata podložna je značajnim varijacijama - pri niskim koncentracijama proteina, taloženje se usporava, a rano zaustavljanje reakcije dovodi do potcjenjivanja rezultata;
  • brzina reakcije taloženja značajno zavisi od mešanja reakcione smeše. Pri visokim koncentracijama proteina, snažno protresanje epruvete može dovesti do stvaranja velikih grudvica i njihove brze sedimentacije.

Sve gore navedene karakteristike metode dovode do značajnog podcjenjivanja koncentracije proteina određene u urinu. Međutim, stepen potcjenjivanja uvelike ovisi o sastavu određenog uzorka urina. Budući da metoda sulfosalicilne kiseline daje podcijenjene vrijednosti koncentracije proteina, normalna granica za ovu metodu od 0,03 g/l je također podcijenjena otprilike tri puta u odnosu na podatke date u stranim referentnim knjigama o kliničkoj laboratorijskoj dijagnostici.

Velika većina laboratorija u zapadnim zemljama odustala je od primjene sulfosalicilne metode za određivanje koncentracije proteina u urinu i aktivno koristi pirogalolnu metodu u te svrhe. Metoda pirogalola za određivanje koncentracije proteina u urinu i drugim biološkim tečnostima zasniva se na fotometrijskom principu merenja optičke gustine obojenog kompleksa nastalog interakcijom proteinskih molekula sa molekulima pirogalol crveno-molibdatnog kompleksa.

Zašto pirogalol metoda daje preciznije rezultate za mjerenje koncentracije proteina u urinu? Prvo, zbog većeg razrjeđenja uzorka urina u reakcijskoj smjesi. Ako je u sulfosalicilnoj metodi omjer uzorak urina/reagens 1/3, onda u pirogalol metodi može se kretati od 1/12,5 do 1/60 ovisno o verziji metode, što značajno smanjuje utjecaj sastava urina na rezultat mjerenja. . Drugo, reakcija se odvija u sukcinatnom puferu, odnosno pri stabilnom pH. I konačno, princip same metode je, moglo bi se reći, „transparentniji“. Natrijum molibdat i pirogalol crvena boja formiraju kompleks sa proteinskim molekulom. To dovodi do činjenice da molekule boje u slobodnom stanju ne apsorbiraju svjetlost na talasnoj dužini od 600 nm u kombinaciji sa proteinom; Dakle, čini se da svaki proteinski molekul označavamo bojom i kao rezultat dobijamo da promjena optičke gustoće reakcione smjese na valnoj dužini od 600 nm jasno korelira s koncentracijom proteina u urinu. Štoviše, budući da je afinitet pirogalol crvenog za različite proteinske frakcije gotovo isti, metoda omogućava određivanje ukupnog proteina urina. Stoga je granica normalnih vrijednosti za koncentraciju proteina u urinu 0,1 g/l (navedena je u svim modernim zapadnim priručnicima o kliničkoj i laboratorijskoj dijagnostici, uključujući i "Klinički vodič za laboratorijske testove", koji je uredio N. Tits ) . Uporedne karakteristike pirogalol i sulfosalicilne metode za određivanje proteina u urinu prikazane su u tabeli 1.

U zaključku želim još jednom naglasiti činjenicu da kada laboratorija pređe sa sulfosalicilne metode za određivanje proteina u urinu na metodu pirogalola, granica normalnih vrijednosti se značajno povećava (sa 0,03 g/l na 0,1 g/ l!). Osoblje laboratorije mora o tome obavijestiti kliničare, jer u trenutnoj situaciji, dijagnoza proteinurije se može postaviti samo ako sadržaj proteina u urinu prelazi 0,1 g/l.

Reference.

  1. Altshuler B.Yu., Rakov S.S., Tkachev G.A. // Pitanje med. hemija. - 2001. - br. 4. - P.426-438.
  2. Kim Yu.V., Potekhin O.E., Tokar M.I., Shibanov A.N. // Lab. med. - 2003. - br. 6. - P.94-98.
  3. Klinički vodič za laboratorijske testove, ur. N. Titsa - M. - Unimed-press - 2003. - 942 str.
  4. Kozlov A.V., Slepysheva V.V. Metode određivanja proteina u urinu: mogućnosti i izgledi // Zbornik radova VII God. SPb nefrol. seminar. - SPb: TNA. - 1999. - P.17-28.
  5. Pupkova V.I., Pikalov I.V., Khrykina E.N., Kharkovsky A.V. // Vijesti "Vector-Best". - 2003. - br. 4 (30).
  6. Chambers R.E., Bullock D.G., Whicher J.T. //Ann. Clin. Biochem. - 1991. - Vol. 28 (Pt 5). - P.467-473.
  7. Klinička laboratorijska medicina. Ed. od Kenneth D. McClatchey. - 2. izd.-2001.- 1993. str.
  8. Eppel G.A., Nagy S., Jenkins M.A., Tudball R.N., Daskalakis M., Balazs N.D.H., Comper W.D. // Clin. Biochem. - 2000. - Vol. 33. - P.487-494.
  9. Franke G., Salvati M., Sommer R.G. Sastav i uređaj za analizu proteina u urinu i način upotrebe istih // US Patent br. 5326707. - 1994.
  10. Kaplan I.V., Levinson S.S. // Clin. Chem. - 1999. - Vol. 45. - P.417-419.
  11. Kashif W., Siddiqi N., Dincer H.E., Dincer A.P., Hirsch S. // Cleveland Clin. J. iz Med. - 2003. - Vol. 70 (6). - P.535-547.
  12. Koerbin G, Taylor L, Dutton J, Marshall K, Low P, Potter JM. // Clin. Chem. - 2001. - Vol. 47. - P.2183-2184.
  13. Le Bricon T., Erlich D., Dussaucy M., Garnier J.P., Bousquet B. // Članak na francuskom. - Ann. Biol. Clin. (Pariz). - 1998. - Vol. 56(6). - P.719-723.
  14. Marshall T., Williams K.M. // Clin. Chem. - 2003. - Vol. 49 (12). - P.2111-2112.
  15. Pugia M., Newman D.J., Lott J.A., D'Mello L., Clark L., Profitt J.A., Cast T. // Clin. Chim. Acta. - 2002. - Vol. 326 (1-2). - P.177-183.
  16. Ringsrud K.M., Linne J.J. Analiza urina i tjelesne tekućine: ColorText i Atlas // Mosby. - 1995. - P.52-54.
  17. Shepard M.D., Penberthy L.A. // Clin. Chem. - 1987. - Vol. 33. - P.792-795.
  18. Williams K.M., Marshall T. // J. Biochem. Biophys. Metode. - 2001. - Vol. 47. - P.197-207.
  19. Williams K.M., Arthur S.J., Burrell G., Kelly F., Phillips D.W., Marshall T. // J. Biochem. Biophys. Metode. - 2003. - Vol. 57(1). - P.45-55.


Sadržaj [Prikaži]

Zdrava osoba dnevno izluči 1,0-1,5 litara urina. Sadržaj 8-10 mg/dl proteina u njemu je fiziološki fenomen. Dnevna norma proteina u urinu je 100-150 mg i ne bi trebalo da izaziva sumnju. Globulin, mukoprotein i albumin čine ukupni protein u urinu. Veliki odljev albumina ukazuje na kršenje procesa filtracije u bubrezima i naziva se proteinurija ili albuminurija.

Svaka tvar u urinu ima "zdravu" normu, a ako razina proteina varira, to može ukazivati ​​na patologiju bubrega.

Opći test urina uključuje korištenje ili prve (jutarnje) porcije ili uzimanje dnevnog uzorka. Potonji je poželjniji za procjenu nivoa proteinurije, jer sadržaj proteina ima izražene dnevne fluktuacije. Urin se skuplja u jednu posudu tokom dana i meri se ukupna zapremina. Za laboratoriju koja testira urin na proteine, standardni uzorak (50 do 100 ml) iz ove posude nije dovoljan; Za primanje dodatne informacije Dodatno se radi Zimnitsky test koji pokazuje da li je nivo urina normalan po danu.

Metode za određivanje proteina u urinu
Pogled Podvrsta Posebnosti
Kvaliteta Hellerov test Ispitivanje urina na prisustvo proteina
Test sulfosalicilne kiseline
Analiza ključanja
Kvantitativno Turbidimetrijski Protein iz urina stupa u interakciju s reagensom, što rezultira smanjenom topljivošću. Kao reagensi se koriste sulfosalicilna i trihloroctena kiselina i benzetonijum hlorid.
Kolorimetrijski Kod nekih supstanci, protein u urinu mijenja boju. Ovo je osnova biuretske reakcije i Lowryjeve metode. Koriste se i drugi reagensi - briljantno plava, pirogalol crvena.
Polukvantitativno Oni daju relativnu predstavu o količini proteina, rezultat se tumači promjenom boje uzorka. Polukvantitativne metode uključuju test trake i Brandberg-Roberts-Stolnikov metod.

Povratak na sadržaj

Protein u urinu normalno kod odrasle osobe ne bi trebao prelaziti 0,033 g/l. U ovom slučaju dnevna norma nije veća od 0,05 g/l. Za trudnice, norma proteina u dnevnom urinu je veća - 0,3 g/l, au jutarnjem isto - 0,033 g/l. Norme proteina se razlikuju u opšta analiza urina i kod dece: 0,036 g/l za jutarnju porciju i 0,06 g/l dnevno. Najčešće se u laboratorijima analiza provodi korištenjem dvije metode, koje pokazuju kolika je proteinska frakcija sadržana u urinu. Gore navedene normalne vrijednosti vrijede za analizu obavljenu sa sulfosalicilnom kiselinom. Ako ste koristili pirogalol crvenu boju, vrijednosti će se razlikovati tri puta.


Povratak na sadržaj

  • filtracija u bubrežnim glomerulima se odvija na pogrešan način;
  • poremećena je apsorpcija proteina u tubulima;
  • Neke bolesti opterećuju bubrege - kada je protein u krvi povišen, bubrezi jednostavno "nemaju vremena" da ga filtriraju.

Ostali uzroci se smatraju nebubrežnim. Tako se razvija funkcionalna albuminurija. Protein se pojavljuje u testu urina kada alergijske reakcije, epilepsija, zatajenje srca, leukemija, trovanje, mijelom, kemoterapija, sistemske bolesti. Najčešće će ovaj pokazatelj u testovima pacijenta biti prvi znak hipertenzije.

Povećanje proteina u urinu može biti uzrokovano nepatološkim faktorima, pa će biti potrebni dodatni testovi

Kvantitativne metode za određivanje proteina u urinu daju greške, pa se preporučuje provesti nekoliko testova, a zatim koristiti formulu za izračunavanje ispravne vrijednosti. Sadržaj proteina u urinu mjeri se u g/l ili mg/l. Ovi proteinski indikatori omogućavaju određivanje nivoa proteinurije, sugerisanje uzroka, procenu prognoze i odlučivanje o strategiji.

Povratak na sadržaj

Za pravilno funkcioniranje tijela neophodna je stalna razmjena između krvi i tkiva. To je moguće samo ako postoji određeni osmotski pritisak u krvnim sudovima. Proteini krvne plazme održavaju takav nivo pritiska kada niskomolekularne supstance lako prelaze iz sredine sa visokom koncentracijom u okruženje sa nižom. Gubitak proteinskih molekula dovodi do oslobađanja krvi iz njenog kanala u tkivo, što je ispunjeno jakim oticanjem. Tako se manifestuje umjerena i teška proteinurija.


Početni stadijumi albuminurije su asimptomatski. Pacijent obraća pažnju samo na manifestacije osnovne bolesti, koja je uzrok pojave proteina u urinu.

Proteinurija u tragovima je povećanje nivoa proteina u urinu usled konzumiranja određenih namirnica

Urin za analizu prikuplja se u čistu posudu bez masti. Prije sakupljanja, perinealni toalet se mora oprati sapunom. Ženama se savjetuje da svoju vaginu prekriju komadom vate ili tamponom vaginalni iscjedak nije uticalo na rezultat. Dan ranije je bolje ne piti alkohol, mineralnu vodu, kafu, začinjenu, slanu hranu i hranu koja boji urin (borovnice, cvekla). Jaka fizička aktivnost, dugo hodanje, stres, povišena temperatura a znojenje, prekomjerna konzumacija proteinske hrane ili lijekova prije davanja urina izazivaju pojavu proteina u analizi urina potpuno zdrave osobe. Ovaj prihvatljivi fenomen naziva se proteinurija u tragovima.

Povratak na sadržaj

Bolesti bubrega koje dovode do gubitka proteina:

  • Amiloidoza. Normalne stanice u bubrezima zamjenjuju se amiloidima (kompleks proteina i saharida), koji sprječavaju normalno funkcioniranje organa. U proteinurskom stadiju, amiloidi se talože u bubrežnim tkivima, uništavajući nefron i, kao posljedicu, bubrežni filter. Na taj način protein iz krvi prelazi u urin. Ova faza može trajati više od 10 godina.
  • Dijabetička nefropatija. Zbog nepravilnog metabolizma ugljikohidrata i lipida dolazi do razaranja krvnih žila, glomerula i tubula u bubrezima. Proteini u urinu su prvi znak predviđene komplikacije dijabetesa.
  • Bolesti upalnog porijekla - nefritis. Najčešće lezije zahvaćaju krvne sudove, glomerule i pijelokalicealni sistem, narušavajući normalan tok sistema filtracije.
  • Glomerulonefritis je u većini slučajeva autoimune prirode. Pacijent se žali na smanjenje količine mokraće, bol u donjem dijelu leđa i povišen krvni tlak. Za liječenje glomerulonefritisa preporučuje se dijeta, režim i terapija lijekovima.
  • Pijelonefritis. U akutnom periodu javlja se sa simptomima bakterijske infekcije: zimica, mučnina, glavobolja. Ovo je zarazna bolest.
  • Policistična bolest bubrega.

U zdravom tijelu, proteinski molekuli (a oni su prilično veliki) nisu u stanju da prođu kroz sistem filtracije bubrega. Zbog toga u urinu ne bi trebalo biti proteina. Ova brojka je ista i za muškarce i za žene. Ako analiza ukazuje na proteinuriju, važno je konzultirati liječnika kako biste saznali razloge. Specijalista će procijeniti koliko je povišen nivo proteina, postoji li popratna patologija i kako vratiti normalno funkcioniranje tijela. Prema statistikama, žene imaju veći rizik od bolesti genitourinarnog sistema od muškaraca.

Princip metode zasniva se na koagulaciji proteina u urinu u prisustvu azotne (ili 20% rastvora sulfosalicilne kiseline).

Napredak rada: dodati 1-2 kapi azotne (ili sulfosalicilne) kiseline u 5 kapi urina. Kada u urinu ima proteina, pojavljuje se zamućenost.

Table. Detekcija patoloških komponenti urina .


Napomena: ako su glukoza i proteini prisutni u urinu koji se ispituje, određuje se njihov kvantitativni sadržaj.

Princip metode : kada protein stupi u interakciju sa pirogalol crvenim i natrijum molibdatom, formira se obojeni kompleks čiji je intenzitet boje proporcionalan koncentraciji proteina u uzorku.

reagensi: Radni reagens – rastvor pirogalol crvenog u sukcinatnom puferu, rastvor za kalibraciju proteina koncentracije 0,50 g/l

Napredak rada:

Promiješajte uzorke i ostavite 10 minuta. na sobnoj temperaturi (18 -25ºS). Izmjerite optičku gustinu uzorka za ispitivanje (Dop) i kalibracionog uzorka (Dk) u odnosu na kontrolni uzorak na λ=598 (578-610) nm. Boja je postojana 1 sat.

Izračun: koncentracija proteina u urinu (C) g/l izračunava se pomoću formule:

C= Dop/Dk×0,50

gdje je: Dop = Dk= C = g/l.

normalne vrijednosti: do 0,094 g/l, (0,141 g/dan)

zaključak:

Princip metode : Kada se D-glukoza oksidira atmosferskim kisikom pod djelovanjem glukoza oksidaze, formira se ekvimolarna količina vodikovog peroksida. Pod djelovanjem peroksidaze, vodikov peroksid oksidira kromogene supstrate (mješavina fenola i 4 aminoantipirina - 4AAP) da bi se formirao obojeni proizvod. Intenzitet boje je proporcionalan sadržaju glukoze.

glukoza oksidaza


Glukoza + O2 + H2O glukonolakton + H2O2

peroksidaza

2H2O2 + fenol + 4AAP obojeno jedinjenje + 4H2O

Napredak rada: dodati 1 ml radnog rastvora i 0,5 ml fosfatnog pufera u dve epruvete. U prvu epruvetu dodajte 0,02 ml urina, a u drugu 0,02 ml kalibratora (kalibracija, standardni rastvor glukoze, 10 mmol/l). Uzorci se miješaju, drže 15 minuta na temperaturi od 370C u termostatu, a optička gustina testnih (Dop) i kalibracionih (Dk) uzoraka u odnosu na radni reagens se mjeri na talasnoj dužini od 500-546 nm.

Izračun: C = Dop/Dk  10 mmol/l Dop = Dk =

zaključak:

Napomena. Ako je sadržaj šećera u urinu veći od 1%, mora se razrijediti.

Trenutno, biohemijske laboratorije koriste jedinstvenu ekspresnu metodu za analizu urina na glukozu pomoću papira za reagens za glukozu Glucotest ili korištenjem kombinovanih test traka za pH, proteine, glukozu, ketonska tijela i krv. Test trake se urone u posudu s urinom na 1 sekundu. i uporedi boju na skali.

Određivanje proteina pomoću pirogalol crvenog indikatora

Princip metode zasniva se na fotometrijskom merenju optičke gustine rastvora obojenog kompleksa nastalog interakcijom proteinskih molekula sa molekulima kompleksa boje Pirogalol crveno-molibdat kompleksa u kisela sredina. Intenzitet boje rastvora je proporcionalan sadržaju proteina u ispitivanom materijalu. Prisustvo deterdženata u reagensu osigurava ekvivalentno određivanje proteina različite prirode i strukture.

Reagensi. 1) 1,5 mmol/l rastvor pirogalol crvenog (PGR): 60 mg PRG se rastvori u 100 ml metanola. Čuvati na temperaturi od 0-5 °C; 2) 50 mmol/l sukcinat pufer rastvor pH 2,5: 5,9 g jantarne kiseline (HOOC–CH2–CH2–COOH); 0,14 g natrijum oksalata (Na2C2O4) i 0,5 g natrijum benzoata (C6H5COONa) rastvoreno je u 900 ml destilovane vode; 3) 10 mmol/l rastvor kristalnog hidrata natrijum molibdata (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg natrijum molibdata se rastvori u 100 ml destilovane vode; 4) Radni reagens: dodati 40 ml rastvora PGA i 4 ml rastvora natrijum molibdata u 900 ml rastvora sukcinatnog pufera. pH rastvora se podešava na 2,5 pomoću 0,1 mol/L rastvora hlorovodonične kiseline (HCl), a zapremina se podešava na 1 L. Reagens u ovom obliku je spreman za upotrebu i stabilan je kada se čuva na mestu zaštićenom od svetlosti i na temperaturi od 2–25°C tokom 6 meseci; 5) 0,5 g/l standardne otopine albumina.

Napredak odlučnosti. U prvu epruvetu dodati 0,05 ml urina, u drugu 0,05 ml standardnog rastvora albumina, a u treću epruvetu (kontrolni uzorak) 0,05 ml destilovane vode, zatim se dodaje 3 ml radnog reagensa. na ove epruvete. Sadržaj epruveta se pomiješa i nakon 10 minuta uzorak i standard se fotometriraju prema kontrolnom uzorku na talasnoj dužini od 596 nm u kiveti s optičkom dužinom puta od 10 mm.


Izračunavanje koncentracije proteina u uzorku testa urina vrši se pomoću formule:

gdje je C koncentracija proteina u uzorku testa urina, g/l; Apr i Ast - ekstinkcija testnog uzorka urina i standardnog rastvora albumina, g/l; 0,5 - koncentracija standardnog rastvora albumina, g/l.

napomene:

  • boja rastvora (kompleks boja) je stabilna jedan sat;
  • direktno proporcionalni odnos između koncentracije proteina u uzorku za ispitivanje i apsorpcije rastvora zavisi od tipa fotometra;
  • ako je sadržaj proteina u urinu iznad 3 g/l, uzorak se razblaži izotoničnim rastvorom natrijum hlorida (9 g/l) i određivanje se ponavlja. Stepen razblaženja uzima se u obzir pri određivanju koncentracije proteina.

Vidi također:

  • Određivanje proteina u urinu
  • Unificirani test sa sulfosalicilnom kiselinom
  • Unificirana Brandberg-Roberts-Stolnikov metoda
  • Određivanje količine proteina u urinu reakcijom sa sulfosalicilnom kiselinom
  • Biuret metoda
  • Detekcija Bence-Jones proteina u urinu

Proteinurija je pojava u kojoj se u mokraći otkriva protein, što ukazuje na mogućnost oštećenja bubrega i služi kao faktor u nastanku bolesti srca, krvnih sudova i limfnih sudova.

Otkrivanje proteina u urinu ne ukazuje uvijek na bolest. Ovaj fenomen je tipičan čak i za apsolutno zdrave ljude, u čijem se urinu može otkriti protein. Hipotermija, fizička aktivnost i konzumacija proteinske hrane dovode do pojave proteina u urinu, koji nestaje bez ikakvog liječenja.

Tokom skrininga, protein se otkriva kod 17% naizgled zdravih ljudi, ali samo 2% od ovog broja ljudi ima pozitivan rezultat kao znak bolesti bubrega.

Molekuli proteina ne bi trebali ući u krv. One su vitalno neophodne organizmu – jesu građevinski materijal za ćelije, učestvuju u reakcijama kao koenzimi, hormoni, antitela. I za muškarce i za žene, norma je potpuni nedostatak proteina u urinu.

Funkciju sprječavanja tijela da izgubi proteinske molekule obavljaju bubrezi.

Postoje dva sistema bubrega koji filtriraju urin:

  1. bubrežni glomeruli - ne propuštaju velike molekule, ali ne zadržavaju albumin, globuline - mali dio proteinskih molekula;
  2. bubrežni tubuli - adsorbuju proteine ​​filtrirane glomerulima i vraćaju ih nazad u krvožilni sistem.

U urinu se nalaze albumin (oko 49%), mukoproteini, globulini, od kojih imunoglobulini čine oko 20%.

Globulini su proteini surutke velike molekularne težine koji se proizvode u imunološkom sistemu i jetri. Većina ih je sintetizirana imuni sistem, odnosi se na imunoglobuline ili antitijela.

Albumin je frakcija proteina koji se prvi put pojavljuje u urinu čak i uz manje oštećenje bubrega. Određena količina albumina prisutna je i u zdravom urinu, ali je toliko neznatna da se ne otkriva laboratorijskom dijagnostikom.

Donji prag koji se može otkriti laboratorijskom dijagnostikom je 0,033 g/l. Ako se dnevno izgubi više od 150 mg proteina, onda se govori o proteinuriji.


Osnovne informacije o proteinima u urinu

Bolest sa blagom proteinurijom je asimptomatska. Vizualno, urin koji ne sadrži proteine ​​ne može se razlikovati od urina koji sadrži malu količinu proteina. Urin postaje pomalo pjenast sa visokim stepenom proteinurije.

Aktivno izlučivanje proteina u urinu može se pretpostaviti na osnovu izgleda pacijenta samo u slučajevima umjerene ili teške bolesti zbog pojave otoka udova, lica i trbuha.

U ranim stadijumima bolesti indirektni znakovi Simptomi proteinurije mogu uključivati:

  • promjene boje urina;
  • sve veća slabost;
  • nedostatak apetita;
  • mučnina, povraćanje;
  • bol u kostima;
  • pospanost, vrtoglavica;
  • povišena temperatura.

Pojava ovakvih znakova ne može se zanemariti, posebno tokom trudnoće. To može značiti neznatno odstupanje od norme, ili može biti simptom razvoj gestoze, preeklampsija.

Kvantificiranje gubitka proteina nije lak zadatak; puna prezentacija Za utvrđivanje stanja pacijenta koristi se nekoliko laboratorijskih testova.

Poteškoće u odabiru metode za otkrivanje viška proteina u urinu objašnjavaju se:

  • niska koncentracija proteina, što zahtijeva visokoprecizne instrumente za prepoznavanje;
  • sastav urina, koji komplicira zadatak, jer sadrži tvari koje iskrivljuju rezultat.

Najviše informacija može se dobiti analizom prve jutarnje porcije urina, koja se prikuplja nakon buđenja.

Uoči analize moraju biti ispunjeni sljedeći uslovi:

  • ne konzumirajte začinjenu, prženu, proteinsku hranu, alkohol;
  • Izbjegavajte uzimanje diuretika 48 sati prije;
  • ograničiti fizičku aktivnost;
  • pažljivo pridržavajte se pravila lične higijene.

Jutarnji urin je najinformativniji, jer se dugo zadržava u bešici i manje zavisi od unosa hrane.

Količinu proteina u urinu možete analizirati pomoću nasumične porcije, koja se uzima u bilo koje vrijeme, ali takva analiza je manje informativna i vjerovatnoća greške je veća.

Da bi se kvantificirali dnevni gubici proteina, radi se analiza ukupnog dnevnog urina. Da biste to učinili, prikupite sav urin izlučen tokom dana u posebnu plastičnu posudu u roku od 24 sata. Možete početi prikupljati u bilo kojem trenutku. Glavni uslov je tačno jedan dan preuzimanja.

Kvalitativna definicija proteinurije zasniva se na sposobnosti proteina da denaturira pod uticajem fizičkih ili hemijskih faktora. Kvalitativne metode su metode skrininga koje omogućavaju određivanje prisutnosti proteina u urinu, ali ne omogućavaju preciznu procjenu stepena proteinurije.

Korišteni uzorci:

  • sa ključanjem;
  • sulfosalicilna kiselina;
  • dušična kiselina, Larionova reagens sa prstenastim Hellerovim testom.

Test sa sulfosalicilnom kiselinom radi se upoređivanjem kontrolnog uzorka urina sa eksperimentalnim, pri čemu se u mokraću dodaje 7-8 kapi 20% sulfosalicilne kiseline. Prisustvo proteina se zaključuje iz intenziteta opalescentne zamućenosti koja se pojavljuje u epruveti tokom reakcije.

Češće se koristi Hellerov test koji koristi 50% dušičnu kiselinu. Osetljivost metode je 0,033 g/l. Pri ovoj koncentraciji proteina u epruveti s uzorkom urina i reagensom pojavljuje se prsten nalik na niti 2-3 minute nakon početka eksperimenta. bela, čije stvaranje ukazuje na prisustvo proteina.

Hellerov test

Polukvantitativne metode uključuju:

  • metoda za određivanje proteina u urinu pomoću test traka;
  • Brandberg-Roberts-Stolnikov metoda.

Brandberg-Roberts-Stolnikov metoda određivanja bazirana je na metodi Hellerovog prstena, ali omogućava precizniju procjenu količine proteina. Prilikom izvođenja testa ovom metodom, koristi se nekoliko razrjeđenja urina kako bi se postigao izgled proteinskog prstena u obliku niti u vremenskom intervalu između 2-3 minute od početka testiranja.

U praksi se koristi metoda test traka sa bojom bromofenol plavom koja se nanosi kao indikator. Nedostatak test traka je njihova selektivna osjetljivost na albumin, što dovodi do iskrivljenih rezultata ako se poveća koncentracija globulina ili drugih proteina u urinu.

Nedostaci metode također uključuju relativno nisku osjetljivost testa na proteine. Test trake počinju da reaguju na prisustvo proteina u urinu kada koncentracija proteina pređe 0,15 g/l.

Metode kvantitativne procjene mogu se podijeliti na:

  1. turbidimetrijski;
  2. kolorimetrijski.

Metode se zasnivaju na svojstvu proteina da smanje rastvorljivost pod uticajem vezivnog agensa da formiraju slabo rastvorljivo jedinjenje.

Sredstva koja izazivaju vezivanje proteina mogu biti:

  • sulfosalicilna kiselina;
  • trihloroctena kiselina;
  • benzetonijum hlorid.

Zaključci o rezultatima ispitivanja se donose na osnovu stepena slabljenja svetlosnog toka u uzorku sa suspenzijom u odnosu na kontrolu. Rezultati ove metode ne mogu se uvek smatrati pouzdanim zbog razlika u radnim uslovima: brzini mešanja reagensa, temperaturi i kiselosti medijuma.

Uzimanje lijekova dan ranije utiče na procjenu prije provođenja testova korištenjem ovih metoda, ne biste trebali uzimati:

  • antibiotici;
  • sulfonamidi;
  • lijekovi koji sadrže jod.

Metoda je pristupačna, što joj omogućava da se široko koristi za skrining. Ali precizniji rezultati mogu se dobiti korištenjem skupljih kolorimetrijskih tehnika.

Osetljive metode koje omogućavaju precizno određivanje koncentracije proteina u urinu uključuju kolorimetrijske tehnike.

Ovo se može uraditi sa velikom preciznošću:

  • biuret reakcija;
  • Lowry tehnika;
  • tehnike bojenja koje koriste boje koje formiraju komplekse s proteinima urina koji se vizualno razlikuju od uzorka.

Kolorimetrijske metode za otkrivanje proteina u urinu

Metoda je pouzdana i visoko osjetljiva, omogućava određivanje albumina, globulina i paraproteina u urinu. Koristi se kao glavni način za razjašnjavanje kontroverznih rezultata testova, kao i dnevnih proteina u urinu pacijenata na nefrološkim odjelima bolnica.

Čak i više tačne rezultate omogućava postizanje Lowryjeve metode koja se zasniva na biuretnoj reakciji, kao i Folinove reakcije koja prepoznaje triptofan i tirozin u proteinskim molekulima.

Da bi se otklonile moguće greške, uzorak urina se pročišćava od aminokiselina i mokraćne kiseline dijalizom. Moguće su greške pri konzumaciji salicilata, tetraciklina i hlorpromazina.

Većina tačan način Definicija proteina zasniva se na njegovoj sposobnosti da se veže za boje, od kojih se koriste sljedeće:

  • Ponceau;
  • Coomassie brilliant blue;
  • pirogalno crvena.

Količina proteina izlučenog u urinu varira tokom dana. Da bi se objektivnije procijenio gubitak proteina u urinu, uvodi se koncept dnevnih proteina u urinu. Ova vrijednost se mjeri u g/dan.

Za brzu procjenu dnevne količine proteina u urinu, količina proteina i kreatinina se određuje u jednoj porciji urina, a zatim se na osnovu omjera protein/kreatinin donosi zaključak o gubitku proteina dnevno.

Metoda se zasniva na činjenici da je brzina izlučivanja kreatinina u urinu konstantna vrijednost i da se ne mijenja tokom dana. Kod zdrave osobe, normalan odnos proteina i kreatinina u urinu je 0,2.

Ova metoda eliminira moguće greške koje se mogu pojaviti pri prikupljanju dnevnog urina.

Kvalitativni testovi imaju veću vjerovatnoću od kvantitativnih da daju lažno pozitivne ili lažno negativne rezultate. Greške se javljaju u vezi sa uzimanjem lijekova, prehrambenim navikama i fizičkom aktivnošću uoči testiranja.

Tumačenje ovog kvalitativnog testa je dato vizuelnom procjenom zamućenosti u epruveti u poređenju rezultata testa sa kontrolom:

  1. slabo pozitivna reakcija ocjenjuje se sa +;
  2. pozitivno ++;
  3. jako pozitivno +++.

Heller ring test preciznije procjenjuje prisustvo proteina u urinu, ali ne kvantifikuje protein u urinu. Kao i test sulfosalicilne kiseline, Hellerov test daje samo približnu predstavu o sadržaju proteina u urinu.

Metoda vam omogućava da kvantitativno procijenite stupanj proteinurije, ali je previše radno intenzivna i netočna, jer se s jakim razrjeđivanjem smanjuje točnost procjene.

Da biste izračunali protein, potrebno je da pomnožite stepen razblaženja urina sa 0,033 g/l:

1 1 1: 2 0,066
1 2 1: 3 0,099
1 3 1: 4 0,132
1 4 1: 5 0,165
1 5 1: 6 0,198
1 6 1: 7 0,231
1 7 1: 8 0,264
1 8 1: 9 0,297
1 9 1: 10 0,33

Test ne zahtijeva posebne uvjete; ovaj postupak se lako može obaviti kod kuće. Da biste to učinili, morate uroniti test traku u urin na 2 minute.

Rezultati će biti izraženi brojem pluseva na traci, čije je dekodiranje sadržano u tabeli:

  1. Rezultati testa koji odgovaraju vrijednosti do 30 mg/100 ml odgovaraju fiziološkoj proteinuriji.
  2. Vrijednosti test traka od 1+ i 2++ ukazuju na značajnu proteinuriju.
  3. Vrijednosti 3+++, 4++++ uočene su kod patološke proteinurije uzrokovane bolešću bubrega.

Test trake mogu samo približno odrediti povećanje proteina u urinu. Ne koriste se za tačnu dijagnozu, a još više ne mogu reći šta to znači.

Test trake ne dozvoljavaju adekvatnu procjenu količine proteina u urinu trudnica. Pouzdanija metoda procjene je određivanje proteina u dnevnom urinu.

Određivanje proteina u urinu pomoću test trake:

Dnevni proteini u urinu služe kao preciznija dijagnostička procjena funkcionalnog stanja bubrega. Da biste to učinili, potrebno je prikupiti sav urin koji bubrezi izlučuju dnevno.

Prihvatljive vrijednosti za omjer protein/kreatinin su podaci dati u tabeli:

Ako gubite više od 3,5 g proteina dnevno, stanje se naziva masivna proteinurija.

Ako u urinu ima puno proteina, potrebno je ponovno ispitivanje nakon 1 mjeseca, zatim nakon 3 mjeseca, na osnovu čijih rezultata se utvrđuje zašto je norma prekoračena.

Razlozi povećanja proteina u urinu su njegova povećana proizvodnja u organizmu i poremećena funkcija bubrega: proteinurija;

  • fiziološki - uzrokuju se manja odstupanja od norme fiziološki procesi, spontano se rješavaju;
  • patološke - promjene nastaju kao rezultat patološkog procesa u bubrezima ili drugim organima tijela, bez liječenja;

Lagano povećanje proteina može se uočiti uz obilnu proteinsku ishranu, mehaničke opekotine, ozljede, praćene povećanom proizvodnjom imunoglobulina.

Blaga proteinurija može biti uzrokovana fizičkom aktivnošću, psiho-emocionalnim stresom i uzimanjem određenih lijekova.

Fiziološka proteinurija se odnosi na povećanje proteina u mokraći djece u prvim danima nakon rođenja. Ali nakon tjedan dana života, sadržaj proteina u urinu djeteta smatra se odstupanjem od norme i ukazuje na patologiju u razvoju.

Bolesti bubrega i infektivne bolesti ponekad su praćene i pojavom proteina u urinu.

Takva stanja obično odgovaraju blagom stepenu proteinurije, prolazni su fenomeni, brzo se sami povlače, bez potrebe za posebnim tretmanom.

Teža stanja, teška proteinurija se opaža u slučaju:

  • glomerulonefritis;
  • dijabetes;
  • bolesti srca;
  • rak bešike;
  • multipli mijelom;
  • infekcije, oštećenja od lijekova, policistična bolest bubrega;
  • visok krvni pritisak;
  • sistemski eritematozni lupus;
  • Goodpastureov sindrom.

Opstrukcija crijeva, zatajenje srca i hipertireoza mogu uzrokovati tragove proteina u urinu.

Vrste proteinurije klasificirane su na nekoliko načina. Za kvalitativnu procjenu proteina možete koristiti klasifikaciju Yaroshevsky.

Prema taksonomiji Yaroshevsky, kreiranoj 1971. godine, razlikuje se proteinurija:

  1. bubrežni - što uključuje poremećenu glomerularnu filtraciju, oslobađanje tubularnog proteina, nedovoljnu resorpciju proteina u tubulima;
  2. prerenalni – javlja se izvan bubrega, uklanjanje hemoglobina iz tijela, proteina koji se pojavljuju u višku u krvi kao rezultat multiplog mijeloma;
  3. postrenalni - javlja se u području urinarnog trakta nakon bubrega, izlučivanje proteina zbog uništavanja mokraćnih organa.

Da bismo kvantifikovali šta se dešava, stepen proteinurije se konvencionalno razlikuje. Mora se imati na umu da oni lako mogu postati ozbiljniji bez liječenja.

Najteži stadijum proteinurije se razvija sa gubitkom više od 3 g proteina dnevno. Gubitak proteina od 30 mg do 300 mg dnevno odgovara umjerenom stadijumu ili mikroalbumnuriji. Do 30 mg proteina u dnevnom urinu znači blagu proteinuriju.

Kolika je normalna količina proteina u urinu?

  1. Normalno, proteina u urinu praktično nema (manje od 0,002 g/l). Međutim, pod određenim uslovima, mala količina proteina može se pojaviti u urinu zdravih osoba nakon konzumiranja veće količine proteinske hrane, kao rezultat hlađenja, tokom emocionalnog stresa ili duže fizičke aktivnosti (tzv. marširajuća proteinurija).

    Pojava značajne količine proteina u urinu (proteinurija) je patologija. Proteinurija može biti uzrokovana bolestima bubrega (akutni i kronični glomerulonefritis, pijelonefritis, nefropatija trudnoće itd.) ili bolestima urinarnog trakta (upala mokraćne bešike, prostate, uretera). Bubrežna proteinurija može biti organska (glomerularna, tubularna i ekscesna) i funkcionalna (febrilna proteinurija, ortostatska kod adolescenata, prekomjerno uhranjenih dojenčadi, kod novorođenčadi). Funkcionalna proteinurija nije povezana sa patologija bubrega. Dnevna količina proteina varira kod pacijenata od 0,1 do 3,0 g ili više. Sastav proteina urina određuje se elektroforezom. Pojava Bence Jones proteina u urinu karakteristična je za mijelom i Waldenstrom makroglobulinemiju, #223;2 mikroglobulin sa oštećenjem bubrežnih tubula.

  2. Normalno, proteina u urinu praktično nema (manje od 0,002 g/l).
  3. Glavni znaci bolesti otkriveni pregledom urina.

    SG Specifična težina. Smanjenje specifične težine ukazuje na smanjenje sposobnosti bubrega da koncentrišu mokraću i uklone otpad iz organizma, što se dešava kod zatajenja bubrega. Povećanje specifične težine povezano je s velikom količinom šećera i soli u urinu. Treba napomenuti da se specifična težina ne može procijeniti samo jednim testom urina;

    Protein Proteini u urinu - proteinurija. Uzrok proteinurije može biti oštećenje samih bubrega zbog nefritisa, amiloidoze ili oštećenja otrova. Proteini u urinu se mogu pojaviti i zbog bolesti urinarnog trakta (pijelonefritis, cistitis, prostatitis).

    Glukoza Glukoza (šećer) u urinu – glukozurija – najčešće uzrokovana dijabetesom melitusom. Više rijedak razlog- oštećenje bubrežnih tubula. Vrlo je alarmantno ako se ketonska tijela otkriju zajedno sa šećerom u urinu. To se dešava sa teškim, deregulisanim dijabetes melitus i predznak je najteže komplikacije dijabetesa – dijabetičke kome.

    Bilirubin, urobilinogen Bilirubin i urobilin se određuju u urinu kod različitih oblika žutice.

    Eritrociti Eritrociti u urinu - hematurija. To se dešava ili kada su sami bubrezi oštećeni, najčešće zbog njihove upale, ili kod pacijenata sa bolestima urinarnog trakta. Ako se, na primjer, kamen po njima pomiče, može ozlijediti sluznicu i u mokraći će biti crvenih krvnih zrnaca. Tumor bubrega koji se raspada također može dovesti do hematurije.

    Leukociti Leukociti u mokraći - leukociturija, najčešće je posledica upalnih promena u urinarnom traktu kod pacijenata sa pijelonefritisom, cistitisom. Leukociti se često otkrivaju prilikom upale spoljašnjih genitalija žena, a kod muškaraca - kod upale prostate.

    Cilindri Cilindri su jedinstvene mikroskopske formacije. Hyaline gips zdrava osoba može imati 1-2. Nastaju u tubulima bubrega; Ali povećanje njihovog broja, odljevci drugih vrsta (granularni, eritrocitni, masni) uvijek ukazuju na oštećenje samog bubrežnog tkiva. Postoje cilindri kod upalnih bolesti bubrega, metaboličkih lezija, na primjer, dijabetes melitusa.

    Informativni sadržaj metode i njena ograničenja. Informativna vrijednost općeg testa urina za identifikaciju specifičnih bolesti bubrega je obično potrebna. Ali ova studija je vrlo važna, posebno kada se provode preventivne studije, jer nam omogućava da prepoznamo rane znakove bolesti bubrega. Poznato je i da se bubrežna oboljenja često javljaju latentno, a samo analiza urina omogućava sumnju na njih i dalju neophodnu pretragu.

  4. U većini laboratorija, prilikom testiranja urina na proteine, prvo koriste kvalitativne reakcije, koji ne otkrivaju proteine ​​u urinu zdrave osobe. Ako se protein u urinu otkrije kvalitativnim reakcijama, provodi se njegovo kvantitativno (ili polukvantitativno) određivanje. U ovom slučaju bitne su karakteristike korištenih metoda koje pokrivaju različit spektar uroproteina. Dakle, pri određivanju proteina pomoću 3% sulfosalicilne kiseline, količina proteina do 0,03 g/l se smatra normalnom, ali kada se koristi pirogalol metoda, granica normalnih vrijednosti proteina se povećava na 0,1 g/l. U tom smislu, obrazac za analizu mora naznačiti normalnu vrijednost proteina za metodu koju koristi laboratorij.

    Prilikom utvrđivanja minimalne količine proteina, preporučuje se ponoviti analizu u sumnjivim slučajevima, treba odrediti dnevni gubitak proteina u urinu. Normalno, dnevni urin sadrži proteine ​​u malim količinama. U fiziološkim uslovima, filtrirani protein se gotovo potpuno reapsorbuje u epitelu proksimalnih tubula i njegov sadržaj u dnevnoj količini urina varira u zavisnosti od različitih autora od tragova do 20-50, 80-100 mg pa čak i do 150-200 mg. Neki autori smatraju da je dnevno izlučivanje proteina u količini od 30-50 mg/dan fiziološka norma za odraslu osobu. Drugi smatraju da izlučivanje proteina u urinu ne bi trebalo da prelazi 60 mg/m2 telesne površine dnevno, ne računajući prvi mesec života, kada količina fiziološke proteinurije može biti četiri puta veća od naznačenih vrednosti.

    Opći uvjet za pojavu proteina u urinu zdrave osobe je njihova dovoljno visoka koncentracija u krvi i molekularna težina ne veća od 100-200 kDa.

  5. ovo nije norma, sa tvojom dijagnozom je to moguce, druga stvar je da je za nefrotski sindrom ovo zapravo mali pokazatelj...pogledaj ambulantu-otok,pritisak itd.nastavi da uzimas propisani tretman..
  6. a ipak ću reći: to NE bi trebalo da bude normalno!

Predviđeni rok definirano:

Po datumu poslednja menstruacija: 280 dana se dodaje prvom danu poslednje menstruacije i dobija se datum očekivanog porođaja. Za brzo i jednostavno utvrđivanje ovog perioda, prema Negeleovom prijedlogu, odbrojite 3 mjeseca unazad od prvog dana posljednje menstruacije i dodajte 7 dana.

Do ovulacije: do menstrualni ciklus odrediti na koji dan dolazi do ovulacije. Od prvog dana poslednje menstruacije odbrojite 3 meseca unazad i dodajte broj dana do ovulacije.

Do datuma prvog pokreta fetusa. Za majke koje su rodile prvi put, 20 sedmica se dodaju na datum prvog pomjeranja fetusa, za višerotkinje se dodaju 22 sedmice.

Prema gestacijskoj dobi koja se dijagnosticira pri prvom pojavljivanju u prenatalna ambulanta. Greška će biti minimalna ako se trudnica konsultuje sa lekarom tokom prvih 12 nedelja trudnoće.

Prema ultrazvučnom pregledu.

Po datumu prenatalnog odsustva. Period prenatalnog odsustva počinje u 30. sedmici trudnoće. Ovom datumu se dodaje 10 sedmica. Za trudnice u području nuklearnog testnog poligona i one koje su mu ekvivalentne, prenatalno odsustvo počinje u 27. sedmici trudnoće i ovom datumu se dodaje 13 sedmica.

Trajanje prenatalnog odsustva.

Potvrda o nesposobnosti za rad zbog trudnoće izdaje se istovremeno na 126 dana, a za one koji žive na području nuklearnog poligona i njima ekvivalentne 170 dana.

17. Određivanje proteina u urinu ekspresnom metodom

Cilj - određivanje proteina u urinu.

Indikacije – hipertenzivna stanja u trudnoći, bolest bubrega kod trudnica

Kontraindikacije - br.

Moguće komplikacije - br

Resursi – posuda, sterilna tegla, epruvete, 30% sulfosalicilna ili 3% sirćetna kiselina, pipeta, alkoholni plamenik.

Akcioni algoritam:

1. Objasnite trudnici potrebu određivanja proteina u urinu.

2. Zamolite trudnicu da skupi urin u sterilnu teglu.

3. Test sa sulfosalicilnom kiselinom: u epruvetu uliti 4-5 ml urina, dodati 6-10 kapi kiseline. Ako u urinu ima proteina, formiraće se sediment ili zamućenje.

4. Testirajte sa 3% sirćetne kiseline: u epruvetu sipajte 8-10 ml mokraće, prokuhajte na alkoholnom plameniku, ako urin sadrži proteine, zamutiće se. Dodajte nekoliko kapi 3% rastvora sirćetne kiseline u zamućen urin. Ako zamućenje nestane u urinu, test je negativan.

Bilješke Određuje se u prijemnom odjeljenju porodilišta.

18. Porođaj. Algoritam za određivanje biološke aktivnosti maternice za porođaj "Oksitocin test"

R-ti 50% rastvor azota vama ili r-u Larionova. Postupak određivanja: u stalak se stavlja red epruveta i sipa se 1 ml rastvora azota, dodaje se 1 ml urina, nanese se na reagens i beleži se vreme kada se pojavi prsten, beležimo vreme prstena izgled. Ako je prsten širok, razrijedite urin.

4. Određivanje koncentracije proteina u urinu sa 3% sulfosalicilne kiseline.

Rastvori: 3% ssk, natrijum hlorid 9%, rastvor albumina 10%. Postupak određivanja: 1,25 ml stavljeno je u dve merne epruvete za centrifugiranje “O” – eksperiment i “K” – kontrola. bistri urin. Eksperimentalnom dodati 3,75 ml 3% rastvora sulfosalicilne kiseline, a kontrolnom 3,75 ml 0,9% rastvora natrijum hlorida. Ostaviti 5 minuta, a zatim fotometrizovati na FEC na talasnoj dužini od 590 – 650 nm (narandžasti ili crveni filter) u kiveti sa debljinom sloja od 5 mm, eksperiment u odnosu na kontrolu. Proračun se vrši prema rasporedu kalibracije ili tablici. Princip metode zasniva se na činjenici da protein sa sulfosalicilnom kiselinom stvara zamućenje, čiji je intenzitet direktno proporcionalan koncentraciji proteina.

5. detekcija glukoze u urinu Gaines-Akimov test. Princip: Glukoza, kada se zagrije u alkalnom okruženju, reducira bakar dihidroksid (žuti) u bakar monohidroksid (narandžasto-crveni). Priprema reagensa: 1) 13,3 g hemikalije. čisti kristalni bakar sulfat (CuSO 4 . 5 H 2 O) rastvor. u 400 ml vode. 2) 50 g natrijum hidroksida se rastvori u 400 ml vode. 3) 15 g čistog glicerina razrijedi se u 200 ml vode. Pomiješajte prvi i drugi rastvor i odmah dodajte treći. Stalci za reagense. Napredak odlučnosti: Dodajte 1 kap urina i 9 kapi reagensa u epruvetu i kuvajte u vodenom kupatilu 1-2 minuta. Pozitivan test: žuta ili narandžasta boja tečnosti ili sedimenta.

6. Kvalitativno određivanje glukoze u urinu metodom glukoza oksidaze. Princip metode: glukoza se oksidira u prisustvu glukoza oksidaze, prema reakciji: Glukoza + O 2 glikonolantom + H 2 O 2. Nastali peroksid H pod djelovanjem peroksidaze oksidira supstrat i formira obojeni proizvod.

Dodajte i inkubirajte 15 minuta na 37 0 C. Pogledajte CPK, kivetu od 5 mm.

Zatim se izračunavaju pomoću formule: C op = Ext op . Cst/ Ect st.

7.Detection ketonska tijela postoji Lestradeov test u urinu. Prašak ili tableta otopine Lestrade nanosi se na staklo (na vrh skalpela), a na njega se nanose 2-3 kapi urina. Ako su prisutna ketonska tijela, pojavit će se ružičasta do ljubičasta boja. Uzorak se ocjenjuje na bijeloj pozadini.

8. Detekcija krvnog pigmenta u urinu testom sa 5% alkoholni rastvor amidopirin.

1.5% alkoholni rastvor amidopirin (0,5 g amidopirina rastvorenog u 10 ml 96% alkohola) 2,3% rastvor peroksida vodonika, 1,5 g hidropirita rastvori se u 50 ml vode) Postupak: 2-3 ml ekstrakta octenog etra ili promućkanog nefiltriranog urina sipa se u epruvetu sa 8-10 kapi 5% rastvora amidopirina 3% rastvora vodikovog peroksida uzima se u obzir najkasnije 2-3 minuta. Uzorak se smatra pozitivnim ako ima sivoljubičastu boju.

Detekcija urobilina u urinu Neubauerovim testom.

Zasniva se na reakciji boje urobilinogena sa Ehrlichovim reagensom koji se sastoji od 2 g paradimetilaminobenaldehida i 100 ml rastvora hlorovodonične kiseline (200 g l). (na 1 ml urina i na 1 ml rastvora. Pojava crvene boje u prvih 30 s ukazuje na povećanje urobilinogena. Normalno, boja se javlja kasnije ili je potpuno izostaje. Kada urin stoji, urobilinogen prelazi u urobilinogen i uzorak može biti lažno negativan. Uzorak se ne može zagrijati, jer se mogu formirati bočni kompleksni spojevi aldehida sa porfirinima, indolom i lijekovima.

Detekcija bilirubina u urinu Rozinovim testom.

Alkoholni rastvor joda (10 g.l): 1 g kristalnog joda rastvori se u cilindru zapremine 100 ml u 20-30 ml rektifikovanog alkohola, a zatim se doda alkoholom do oznake u hemijsku epruvetu 4-5 ml urina za ispitivanje i pažljivo nanijeti alkoholni rastvor joda (ako je urina malo relativna gustina, onda ga treba nanijeti na alkoholni rastvor joda, ako je prisutan bilirubin, na granici između tekućina postoji zeleni prsten (prilikom uzimanja antipirina, kao i kada je soda prisutna u urinu, test pigmenta u krvi). ispostavilo se da je pozitivan kod zdrave osobe, ovaj test je negativan.

Ispitivanje urina metodom suhe hemije (mono-politestovi).

Princip. Metoda se temelji na učinku koji protein ima na boju indikatora u puferskoj otopini, uslijed čega boja mijenja boju iz žute u plavu.

Prilikom provođenja reakcije na prisustvo proteina u urinu i određivanja pH pomoću indikatorskog papira, preporučuje se pridržavanje sljedećih uputa:

  1. Sakupite urin u dobro oprano posuđe.
  2. Koristite svježe sakupljen urin bez konzervansa.
  3. Pažljivo zatvorite pernicu nakon što iz nje uklonite potreban broj indikatorskih traka papira.
  4. Ne dirajte prstima zone indikatora.
  5. Koristite samo unutar roka trajanja naznačenog na etiketi.
  6. Pridržavajte se pravila za čuvanje indikatorskog papira.
  7. Procijenite rezultate u skladu s uputama u uputama.

Izvođenje analize urina pomoću suhe kemijske analize urina.

Napredak odlučnosti. Traka indikatorskog papira se ukloni iz pernice i uroni u urin koji se testira tako da istovremeno navlaži obje indikatorske zone. Nakon 2-3 sekunde, traka se stavlja na bijelu staklenu ploču. Odmah procijenite pH pomoću skale boja na pernici. pH vrijednost na skali boja odgovara 6,0 (ili manje); 7.0; 8.0; 9.0.

Priprema urina, priprema preparata iz sedimenta urina za mikroskopski pregled aproksimativnom metodom.

Mikroskopsko ispitivanje sedimenta urina provodi se indikativnom metodom za opću analizu i kvantitativno brojanje formiranih elemenata radi preciznije procjene stupnja luikociturije i hematurije.

Pravila za pripremu sedimenta urina za mikroskopiju.

Mikroskopski pregled prva jutarnja porcija urina podliježe.

Nakon prethodnog miješanja, uzima se 10 ml urina i centrifugira 10 minuta na 1500 o/min.

Zatim se centrifugalna epruveta sa urinom oštrim pokretom prevrne, a supernatantna tečnost se brzo izlije u praznu teglu.

Promiješajte, stavite kap na staklo i pažljivo prekrijte pokrovnim stakalcem.

Ako se sediment sastoji od više slojeva, pripremite preparat, a zatim ponovo centrifugirajte i pripremite preparate od svakog sloja posebno.

Ako oku nema vidljivog sedimenta, kap urina se nanese na predmetno staklo i mikroskopski pregleda.

Prvo se ispituje materijal pri malom uvećanju (okular 7-10, objektiv 8), kondenzator se spušta, otvor blago sužava, zatim se uzorak detaljno proučava pri velikom povećanju (okular 10,7; objektiv 40).

14.Kvantitativna studija sedimenta urina prema Nechiporenko.

Metoda se koristi za skrivene trome upalnih procesa(pijelonefritis, glomerulonefritis), skrivena piurija. Proučiti patološki proces u dinamici. Za procjenu efikasnosti tretmana. Prednosti metode: tehnički jednostavan, ne zahtijeva veliku količinu urina i dugotrajan je. njegovo skladištenje, koristi se u ambulantna praksa. Obaveza uslovima: jutarnji urin, srednja porcija, kiseli rastvor (u alkalnom urinu može doći do delimične dezintegracije ćelijskih elemenata). 1. Pomiješajte mokraću 2. Stavite 10 ml urina u mjernu cijev za centrifugiranje i centrifugirajte 10 minuta na 1500 o/min. 3. Nakon centrifugiranja. sisanje Pipetirajte vrh tečnosti, ostavljajući. tačno 1 ml sedimenta. 4. Talog se temeljno izmiješa i Gorjajevljeva komora se napuni. 5. 3-5 minuta nakon punjenja počnite brojati formirane elemente. 6. Brojanje leukocita, Er, cilindri sa okularom 15, sočivo 8 sa izostavljanjem. kondenzator, u 100 velikih kvadratnih komora. Odvojeno se broje leukociti, Er, cilindri (izbrojavaju se najmanje 4 Gorjajevske komore) i podloga se uklanja. arif. X=A x 0,25x 10 6 /l. Norma: leuk. 2-4x 10 6 /l, Er do 1 x 10 6 /l, cilindri do 0,02 x 10 6 /l (jedan za 4 komore). Kod djece: leukemija. do 2-4x 10 6 /l, Er do 0,75 x 10 6 /l, cilindri do 0,02 x 10 6 /l.

15. Pregled urina prema Zimnitskom

Ovaj test utvrđuje sposobnost bubrega da se koncentrišu. i razblažite urin. Esencija pečata uzorka. u dinamičkom određivanju relativne gustine i količine urina u trosatnim porcijama tokom dana. Sprovođenje testa: nakon pražnjenja bešike u 6 sati ujutro u toalet, pacijent sakuplja urin u posebne tegle svaka tri sata tokom dana. Ukupno 8 porcija. Napredak istraživanja: 1. Isporuka. Urin se stavlja po satu, a količina i relativna gustoća se određuju u svakoj porciji. 2. Uporedite dnevnu količinu urina i količinu popijene tečnosti da biste utvrdili. % njegovog izlučivanja. 3. Izračunajte dnevnu i noćnu diurezu, zbrojite je i dobijete dnevnu diurezu. 4. Podesite opseg fluktuacija u količini i relativno. gustina urina po danu, tj. koja je razlika između mala porcija i veliki. Pokaži. uzorci zdravih ljudi ljudi: 1. Dnevna diureza 800-1500 ml. 2. Dnevna diureza značajno prevladava nad noćnom diurezom. 3. Značajne su fluktuacije zapremine urina u pojedinačnim porcijama (od 50 do 400 ml). 4. Fluktuacije p od 1,003 do 1,028, treba da budu veće od 0,008. Sa funkcijom zatajenje bubrega: hipostenurija, hipoizostenurija, izostenurija, hiperstenurija, oligurija, anurija, nokturija.

16. Opis opšta svojstva feces

Normalno, izmet se sastoji od produkata lučenja i izlučivanja probavnog trakta, ostataka neprobavljenih ili djelomično probavljenih prehrambeni proizvodi, mikrobna flora. Količina izmeta je 100-150 g. Konzistencija je gusta. Oblik je cilindričan. Miris je normalan. Boja je smeđa. R-tion - neutralan, blago alkalni ili blago kiseli (pH 6,5-7,0-7,5). Sluz-odsutna. Krv-odsutan. Nema ostataka nesvarene hrane.



Podijeli: